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抗氧化剂是一类能帮助捕获并中和自由基,从而祛除自由基对人体损害的一类物质。植物中发现的许多酚类化合物以及一些维生素,都具有抗氧化活性。通常用比色法衡量总抗氧化能力,表示为Trolox(水溶性维生素E)当量或没食子酸当量。
目前对抗氧化剂测试方法的要求不仅是能检测样品的总抗氧化能力,还要求根据抗氧化剂的生物效益对其进行区分和量化分析。我们的方法研究表明,比色法试剂如福林酚试剂和ABTS试剂,均可以通过高效液相色谱柱后衍生化法对食品和膳食补充剂中抗氧化剂进行分析。
福林酚测试法,在碱性条件下,多酚或其他抗氧化剂可以将磷钨钼酸还原成蓝色,蓝色深浅与多酚或其他抗氧化剂含量成正比,可以用分光光度计进行测定。该试剂对酚类和非酚类抗氧化剂,包括维生素C、维生素B1和叶酸,具有很高灵敏度,对许多抗氧化剂检测限低至1 ug/mL。
ABTS试剂用于总抗氧化能力(TEAC)法。在抗氧化物存在时ABTS+的产生会被抑制,并可通过紫外检测器检测吸光度间接计算抗氧化能力,该检测方法可以分析40-200 ug/ml的抗氧化剂。
使用上述两种试剂可以对目标化合物进行定性和定量分析,并通过与Trolox或没食子酸标准曲线图谱比较计算样品的总抗氧化能力。